Banca de DEFESA: BRENNA CELINA FERREIRA DE CARVALHO
Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: BRENNA CELINA FERREIRA DE CARVALHO
DATA: 18/04/2017
HORA: 09:00
LOCAL: Sala 02 - Prédio PROPPIT
TÍTULO: ISOLAMENTO E CARACTERIZAÇÃO BIOQUÍMICA E
BIOLÓGICA DE UM PEPTÍDEO ANTIMICROBIANO
EXTRAÍDO DA PEÇONHA DO ESCORPIÃO Tityus obscurus
Gervais 1843 (SCORPIONES, BUTHIDAE).
PALAVRAS-CHAVES: Candida albicans, peptídeo antimicrobiano, Tityus obscurus
PÁGINAS: 80
GRANDE ÁREA: Outra
ÁREA: Ciências Ambientais
RESUMO: As peçonhas de escorpiões são fontes de moléculas bioativas como os Peptídeos
Antimicrobianos (PAMs). Tais moléculas pertencem à imunidade inata e são ubíquas
no reino animal e vegetal. Este trabalho teve o objetivo de purificar e caracterizar um
peptídeo antimicrobiano extraído da peçonha do escorpião T. obscurus da região
Oeste do Pará, Brasil. A coleta dos animais ocorreu na Floresta Nacional do Tapajós
e a extração das peçonhas foi feita através da técnica de eletroestimulação usando
uma fonte elétrica. O perfil eletroforético foi determinado pela eletroforese em gel de
poliacrilamida 15% SDS-PAGE. O peptídeo antimicrobiano purificado (P42) teve
eluição em 42 min através da Cromatografia Líquida de Alta Eficiência em fase reversa
(rp-CLAE). Os ensaios antimicrobianos foram realizados com bactérias Escherichia
coli Gram (-), Staphylococcus aureus Gram (+) e com fungos Candida albicans, C.
tropicalis e C. parasiplosis através de métodos padronizados de sensibilidade por
disco difusão e de determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM)
protocolados pela Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI), para fungos
(normas M44-A e M27-A2) e bactérias (norma M2A-9). O efeito hemolítico de P42 foi
testado em eritrócitos de camundongos e para monitorar a cinética de sua
citotoxicidade foram geradas imagens por microscopia confocal. A massa molecular
de P42 foi obtida através da técnica de espectrometria de massas MALDI-TOF e a
sua sequência de aminoácidos através da Degradação de Edman. O peptídeo (P42)
foi ativo apenas contra o fungo C. albicans e a sua massa molecular foi de 7284,4 Da.
Os valores de CIM do peptídeo contra as espécies de Candida foi 3,5 - 7,0 µM e para
o fluconazol 6,0 - 12,0 mM. P42 não foi hemolítico em eritrócito de camundongos. A
microscopia confocal detectou DNA espalhado após 3h de tratamento com o peptídeo
natural. A estrutura primária desse peptídeo consistiu de 30 aminoácidos e 97% de
identidade com a toxina To4 de T. obscurus. Esses resultados demonstram, pela
primeira vez, a existência de um PAM nativo obtido diretamente da peçonha de T.
obscurus, expandindo as opções de possíveis novas aplicações terapêuticas.
MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 1684515 - JOACIR STOLARZ DE OLIVEIRA
Externo à Instituição - JUAREZ DE SOUZA - IESP
Externo à Instituição - LUCIANO DE SOUSA CHAVES - UFPA
Notícia cadastrada em: 12/04/2017 16:49