Banca de QUALIFICAÇÃO: ANA LUIZA FIGUEIRA DA SILVA

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : ANA LUIZA FIGUEIRA DA SILVA
DATA : 20/12/2024
HORA: 15:00
LOCAL: virtualmente pelo link: https://meet.google.com/pqq-asae-hpw
TÍTULO:

ISOLAMENTO E CARACTERIZAÇÃO DE BACTERIÓFAGOS ANTI-Pseudomonas aeruginosa DE ESGOTOS DO NORTE BRASILEIRO: UM ENFOQUE PIONEIRO DE PROSPECÇÃO

PALAVRAS-CHAVES:

Esgoto, Fagos, Pseudomonas aeuginosa, Fagoterapia, Região Amazônica

PÁGINAS: 40
RESUMO:

O uso excessivo de antibióticos tem contribuído para a prevalência cada vez maior de cepas de Pseudomonas aeruginosa que demonstram resistência a uma variedade de agentes antimicrobianos. Até 2050, há uma estimativa de que mais de 10 milhões de pessoas morram em decorrência de infecções por bactérias multirresistentes a antibióticos, superando o câncer em temos de mortalidade. O uso de bacteriófagos (fagos), vírus que infectam bactérias e são capazes de mata-las, torna-se uma alternativa à antibioticoterapia. Dado o alto nível de biodiversidade na região Amazônica, o Norte se torna uma fonte promissora de descoberta de novos fagos. Portanto, o objetivo deste estudo foi isolar, pela primeira vez, bacteriófagos anti-P. aeruginosa em amostras de esgoto de diversas regiões do Norte do Brasil. O cultivo das cepas de P. aeruginosa (PA14, ATCC 27853, CCD-P003, PA01 e PA17) foi realizado em 5 mL de caldo Luria Bertani (LB) e incubadas em estufa por 48 horas a 37 °C. As coletas de esgoto foram realizadas em Santarém-PA, Macapá-AP, Rio Branco-AC, Belém-PA, Manaus-AM e Porto Velho-RO. Um total de 50 mL de cada amostra de esgoto foi centrifugado a 4000 rpm por 30 minutos e o sobrenadante foi filtrado com membrana de 0,45 µm. Os filtrados foram submetidos ao enriquecimento fágico, onde foram misturados 2 mL de filtrado, 40 mL de meio LB e 4mL de cultura bacteriana. Após a incubação por 18 horas a 37 °C em incubadora Shaker sob agitação a 140 rpm, 20 mL foram centrifugados e o sobrenadante foi filtrado novamente. Testes para a presença de fagos líticos anti-P. aeruginosa foram realizados usando o método de ágar de dupla camada. A purificação foi realizada por três rodadas de isolamento usando o método de ágar de dupla camada. Fagos promissores para a terapia fágica são aqueles que são capazes de lisar o maior número de cepas dentro da mesma espécie bacteriana, razão pela qual o teste de intervalo de hospedeiros foi realizado. Até o presente estudo foram isolados e purificados um total de 70 fagos anti-P. aeruginosa. Foi observado que fagos isolados do esgoto de Santarém-PA demonstraram a capacidade de lisar todas as cepas de P. aeruginosa testadas e quatro outros fagos (isolados de Santarém-PA, Manaus-AM, Rio Branco-AC e Macapá-AP) foram capazes de lisar três cepas diferentes de P. aeruginosa. Esses fagos serão submetidos posteriormente ao teste de Host range e extração de DNA e susceptibilidade das células planctônicas e do biofilme. Esses resultados apontam para uma nova alternativa ao combate a infecção por P. aeruginosa e o desenvolvimento futuro de um coquetel fágico, com potencial aplicação na fagoterapia. Além de abrir caminhos para estudos inéditos sobre bacteriófagos de esgotos da Amazônia, ainda não explorados na literatura, tornando este estudo pioneiro e promissor.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - ***.020.516-** - MATEUS DE SOUZA TERCETI - UFMG
Externo ao Programa - ***.645.522-** - MARCOS DIONES FERREIRA SANTANA - UFOPA
Externo à Instituição - RAPHAEL BRITO DOS SANTOS - UFAM