AVALIAÇÃO DA DIVERSIDADE E IDENTIFICAÇÃO DE FUNGOS ENDOFÍTICOS ISOLADOS DE Piper marginatum JACQ.
Diversidade fúngica, Piperaceae, bioprospecção
Endófitos são organismos presentes no interior dos tecidos vegetais sem causar danos aparentes, por pelo menos um ciclo de vida, podem alterar os processos bioquímicos envolvidos nas relações endofíticos-plantas hospedeiras, produzindo novas biomoléculas, com potencial biotecnológico e uso em diferentes áreas da indústria farmacêutica e agrícola. A espécie Piper marginatum JACQ. (Piperaceae) popularmente conhecida como pimenta-do-mato, malvarisco, capeba-cheirosa é amplamente usada pela medicina popular por apresentar um alto potencial terapêutico no tratamento de lesões na pele, atividade antimicrobiana e antiparasita, acaricida, inseticida, entre outras. Mesmo com diversas utilizações etnofarmacológicas, existem poucos estudos que buscam estudar a comunidade endofíticas associada a essa planta. Nesse sentido, o objetivo desse trabalho foi a avaliação da diversidade de fungos endofíticos associados a P. marginatum. (Piperaceae). Fragmentos das folhas foram desinfestados superficialmente em álcool 70%, em hipoclorito 3% e novamente em álcool 70%, água destilada estéril e inoculados em meio de cultura Ágar Dextrose Batata (BDA) para isolamento dos fungos endofíticos. As placas foram incubadas por até 30 dias e os fungos obtidos isolados e purificados em BDA. Todos os fungos obtidos foram preservados e serão depositados na Coleção de Microrganismos da Universidade Federal do oeste do Pará. A taxa de colonização fúngica foi avaliada por observação macroscópica e agrupadas conforma características morfológicas. A identificação dos fungos foi realizada por meio do sequenciamento da região transcrita interna (ITS1e ITS4) do gene do rRNA. Para extração do DNA fúngico foi utilizado um método utilizando-se o kit para extração WizardÒ Genomic DNA Purification, Promega. As sequências de DNA dos fungos endofíticos serão comparadas com as sequências, depositadas no GenBank utilizando o programa BLAST (Basic Local Alignment Search Tool – versão 2.215 do BLAST 2.0 disponível no portal NCBI (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/blast/), desenvolvido pelo National Center For Biotechnology. Os fungos que apresentaram sequências com valor de E = 0, cobertura e identidade ≥99%, bem como proximidade quando analisadas filogeneticamente com sequências de espécies tipo ou referência, utilizando o programa MEGA 6 (Molecular Evolutionary Genetics Analysis). Após purificação foram obtidos 171 isolados de fungos filamentosos, a taxa de colonização fúngica foi de 98,33% os quais foram agrupados utilizando suas características morfológicas em 18 morfogrupos. Nas análises morfológica, foram classificados nos seguintes gêneros de acordo com as características das colônias.